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紅棗紅變與葉綠素酶活力的關系

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紅棗紅變與葉綠素酶活力的關系

本文作者:縱偉張沙沙趙光遠張華作者單位:鄭州輕工業學院食品與生物工程學院

紅棗是一種深受廣大消費者喜愛的我國特有的經濟果品[1],是由鮮棗經干燥制備而成,在紅棗的干燥前處理過程中,需要進行加熱處理,在加熱處理過程中,鮮棗的色澤會發生紅變,紅變作用的程度直接影響到產品的外觀品質,但鮮棗在熱處理下紅變的機理,目前還不清楚。一些研究認為,果實顏色的色素主要是葉綠素、類胡蘿卜素和黃酮色素[2-3],紅色果實成熟期的著色是由于果實細胞中的葉綠素降解,同時顯出或形成花青苷的結果[4];同時有研究發現綠色葉片衰老過程中葉綠素酶活性提高,葉綠素降解加劇[5];但也有研究發現,葉綠素酶活性的變化在不同植物中表現不同,葉綠素酶活性的提高與葉綠素含量的下降并不完全一致[6]。為明確棗紅變過程中色澤變化和葉綠素酶活性的變化的相互關系,本文對不同溫度處理后,棗紅變過程中色澤變化和葉綠素酶活性的變化進行相關性研究,初步探討鮮棗熱處理后的紅變機理,以便為紅棗加工提供理論指導。

1材料和方法

1.1材料

實驗挑選大小基本一致、無機械傷、無病蟲害、白熟狀態的新鄭棗園的冬棗為原料。丙酮、乙醇、正己烷等:分析純。

1.2儀器

SC-80C全自動測色色差計:深圳市深博瑞儀器儀表有限公司;1810系列紫外可見分光光度計:北京普析通用儀器有限責任公司;HC-3618R高速冷凍離心機:鄭州南北儀器設備有限公司。

1.3方法

1.3.1鮮棗熱水處理

將冬棗分別用放入60、65、70、75℃熱水處理1min,然后在室溫下放置0~100min,測定其色澤指標和葉綠素酶活性。

1.3.2色澤測定

采用SC-80C全自動測色色差計測定果皮的顏色[7]。采用L*a*b*表色系。記錄L*、a*、b*值表示果實顏色,其中L*表示亮度,范圍從黑=0到白=100;a*值的正值表示色澤紅/紫,負值表示淺藍/綠;b*的正值表示黃,負值表示藍。

1.3.3葉綠素酶活性測定

葉綠素酶粗酶液的提取參考周鳳麗等[8]的方法:將丙酮放置在4℃冰箱里遇冷過夜,將果皮洗凈晾干,稱取適量,剪碎,加入冷丙酮勻漿,抽濾,并用冷丙酮反復沖洗至濾渣無色。收集濾渣,風干后得丙酮粉。稱取2g丙酮粉,加入50mL20mmol/L磷酸緩沖溶液(pH7.0),冰浴,置于磁力攪拌器上中速攪拌。以8000×g、4℃條件下離心20min,取上清液備用。底物的制備參考李云等[9]的方法:取0.5g干凈冬青樹葉,剪碎,裝入具塞試管中,加入無水乙醇-丙酮混合液(體積比為1:1)10mL,加蓋,放置于暗處,直到葉片完全變白。葉綠素酶活性的測定參考周鳳麗[8]方法:取100μL酶液、100μL的葉綠素溶液,加入到37℃水浴中的緩沖體系中,緩沖體系為:900μL20mmol/L含0.24%TritonX-100磷酸緩沖溶液(pH7.0)。反應30min后,加入3.3mL反應終止劑[丙酮:正己烷(v/v)=2:3],渦旋終止反應8000×g離心10min,使分層。去下層液300μL加稀釋液(磷酸緩沖溶液:丙酮=1:1)2.4mL,混勻,測定667nm吸光度值。

2結果與討論

2.1不同的溫度處理后鮮棗色澤指標的變化

冬棗分別在60、65、70、75℃熱水處理1min后,靜置不同的時間,不同的溫度處理后鮮棗色澤指標的變化見圖1。a*值越大表示顏色越紅。由圖1可以看出,不同溫度熱水處理后,a*值都增大,前期變化較快,后期變化速度較緩慢,此變化趨勢與李遠華的報道相似[5],說明鮮棗發生了紅變;不同溫度熱水處理后,b*值都降低,處理溫度越低,變化越不明顯;不同溫度熱水處理后,L*值也都降低,說明鮮棗經熱水處理后,果皮色澤會變暗。

2.2不同溫度處理后果皮葉綠素酶活性變化

冬棗分別在60、65、70、75℃熱水處理1min后,靜置不同的時間,不同的溫度處理后果皮葉綠素酶活性變化見圖2。從圖2中可知,4種處理溫度,在室溫下放置前期葉綠素酶活性均呈先上升后下降,后期又升高的趨勢。相應溫度的最高酶活相比,65、70℃處理后葉綠素酶的活性比60、75℃高。

2.3鮮棗紅變指標(a*)與葉綠素酶活性變化的相關性分析

利用SPSS軟件對鮮棗紅變指標(a*)與葉綠素酶活性變化進行相關性分析,熱水溫度為65、70℃,紅變指標a*與葉綠素酶活性相關性較顯著(相關系數R65℃=-0.923*、R70℃=-0.868),說明葉綠素酶活性是鮮棗熱激后紅變的主要因素;而熱水溫度為60℃時,二者相關性不顯著(R60℃=-0.14),說明葉綠素酶活性與鮮棗紅變關系不大;熱水溫度為75℃時,二者相關性不太顯著(R75℃=-0.617)。

3結論

熱激處理發生紅變和采用的處理溫度有密切關系,65、70℃熱激處理,葉綠素酶的活性較高,導致果實細胞中的葉綠素降解,綠色降低,同時導致花青苷色澤顯示出來,紅色增加,因此鮮棗色澤與葉綠素酶活性顯著相關,葉綠素酶直接參與鮮棗的紅變。

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